FDA規(guī)定的肽是指由40個或更少氨基酸組成的聚合物。肽類藥物區(qū)別于化學(xué)藥物的一個重要特征就是結(jié)構(gòu)表征的完全性。肽類仿制藥物中的活性成分能否與RLD產(chǎn)品，特別是重組脫氧核糖核酸(rDNA)來源的RLD產(chǎn)品中的活性成分相一致，一直是FDA的審查要點，也是制約肽類仿制藥物只能按照NDA申報的重要因素。

　　但FDA是與時俱進(jìn)的。鑒于目前肽合成和表征技術(shù)的現(xiàn)狀， FDA認(rèn)為ANDA申請人已經(jīng)可以證明仿制合成肽類藥物與rDNA來源的RLD中的活性成分的相同性，即證明這些產(chǎn)品是藥物等同的。因此FDA在2017年10月2日發(fā)布了《ANDAs for Certain Highly Purified Synthetic Peptide Drug Products That Refer to Listed Drugs of rDNA Origin》指南，建議五種肽類：胰高血糖素(Glucagon)、利拉魯肽(Liraglutide)、奈西立肽(Nesiritide)、特立帕肽(Teriparatide)和 替度魯肽(Teduglutide)的仿制合成藥物可以按照ANDA途徑進(jìn)行申報，并提出了具體的技術(shù)要求。筆者總結(jié)了指南中的干貨內(nèi)容，重新梳理了邏輯順序，以便讀者能更輕松愉悅的領(lǐng)會指南內(nèi)容。

　　一、關(guān)于指南的基本問題

　　1、本指南的目的是什么？

　　對于以前批準(zhǔn)上市的重組脫氧核糖核酸(rDNA)來源的肽類藥物產(chǎn)品，本指南旨在協(xié)助提交該類藥物的申請人確定在什么情況下可以通過ANDA途徑，而不是NDA途徑來申請。

　　2、本指南涵蓋的肽類藥物品種有哪些？

　　本指南涵蓋以下五種肽藥物產(chǎn)品：胰高血糖素(Glucagon)、利拉魯肽(Liraglutide)、奈西立肽(Nesiritide)、特立帕肽(Teriparatide)和 替度魯肽(Teduglutide)。

　　3、為什么本指南選擇了上述五種肽類藥物？

　　本指南所涵蓋的五種肽類藥物已經(jīng)很好地表征了核苷酸序列來源的肽相關(guān)雜質(zhì)概況。因此，將仿制合成肽類藥物的肽相關(guān)雜質(zhì)譜與其RLD進(jìn)行比較的方法是可行的。此外，F(xiàn)DA認(rèn)為鑒于分析化學(xué)、合成肽制造和純化技術(shù)以及生物測定方面的研究進(jìn)展，F(xiàn)DA可以確定和降低與肽相關(guān)雜質(zhì)相關(guān)的風(fēng)險。

　　4、肽類藥物存在的潛在風(fēng)險有哪些？

　　肽是由重組或合成產(chǎn)生的，氨基酸序列或殘基的插入，缺失或修飾都能產(chǎn)生對應(yīng)的雜質(zhì)。這些雜質(zhì)通常具有較小的安全性或有效性風(fēng)險，而且是可控的。然而，在某些情況下，肽相關(guān)雜質(zhì)可能存在潛在的免疫原性差異，可能會影響肽藥物產(chǎn)品的安全性或有效性。

　　5、FDA對于ANDA申請的審查要求有哪些？

　　關(guān)于FDA對于ANDA申請的批準(zhǔn)，申請人必須證明仿制藥物與RLD具有“相同”活性成分，用法用量、劑型、給藥途徑、規(guī)格和RLD標(biāo)簽(允許某些差異)，并且與RLD具有生物等效性。此外，F(xiàn)DA必定審查仿制藥產(chǎn)品的制造，加工和包裝的方法、設(shè)備和控制措施，以確保其特性、規(guī)格、質(zhì)量和純度。

　　在審查ANDA時，F(xiàn)DA會將仿制藥品中存在的雜質(zhì)類型和數(shù)量與RLD相比較。雖然仿制藥物與RLD之間雜質(zhì)特征方面的某些差異可能是允許的，但FDA通常會評估一種仿制藥物是否含有大于RLD中發(fā)現(xiàn)的雜質(zhì)，以及雜質(zhì)(包括新雜質(zhì))存在的合理性，以確保仿制藥物與RLD相比，不會帶來更大的安全隱患。

　　6、合成肽類藥物按照ANDA途徑申請的核心要求是什么？

　　本指南推薦肽類藥物按照ANDA途徑申請的條件主要是為確保與rDNA來源的RLD相比，由于肽相關(guān)雜質(zhì)引起的免疫原性無風(fēng)險差異。

　　對于想要“復(fù)制”以前批準(zhǔn)的rDNA來源肽的合成肽，是否應(yīng)該作為ANDA申請，在很大程度上取決于其與rDNA來源肽類藥物在雜質(zhì)特征方面的比較，因為肽相關(guān)雜質(zhì)的差異可能影響肽類藥物產(chǎn)品的安全性或有效性。

　　二、FDA關(guān)于仿制合成肽類藥物的科學(xué)考慮

　　1、活性成分相同

　　是否符合法定ANDA申報要求的關(guān)鍵因素是仿制藥中的活性成分是否與RLD“相同”。 仿制合成肽類藥物中活性成分的相同性可以通過物理化學(xué)表征和生物學(xué)評估來確定。盡管本指南草案涵蓋的一些肽類藥物可能有可用的規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)，但仍推薦對仿制合成肽類藥物和RLD產(chǎn)品進(jìn)行比較測定。鼓勵A(yù)NDA申請人酌情應(yīng)用互補(bǔ)分析方法來表征以下性質(zhì)和其他性質(zhì)：

　　● 初級序列和物理化學(xué)性質(zhì)

　　● 二級結(jié)構(gòu)

　　● 低聚物/聚集狀態(tài)

　　● 生物活性(通過體外或動物研究)

　　在數(shù)據(jù)表明仿制合成肽中的活性成分與RLD中的活性成分“相同”的情況下。應(yīng)該按照ANDA途徑提交申請還是按照505(b)(2)提交申請，可能取決于提出的產(chǎn)品的雜質(zhì)特征，因為雜質(zhì)的差異可能會影響免疫原性的潛力。

　　2. 雜質(zhì)

　　在審查ANDA時，F(xiàn)DA會將仿制藥中存在的雜質(zhì)類型和數(shù)量與其RLD相比較。通常，仿制合成肽不應(yīng)含有大于RLD中發(fā)現(xiàn)的雜質(zhì)。任何雜質(zhì)，包括新的雜質(zhì)都應(yīng)該是有道理的，以幫助確保仿制藥比RLD不會帶來更大的安全風(fēng)險，包括免疫原性。

　　無論肽類藥物是通過重組還是合成產(chǎn)生的，它都可能含有生產(chǎn)過程引入的雜質(zhì)和在貯存過程中由于降解產(chǎn)生的雜質(zhì)。由于仿制肽類藥物與RLD具有相同的活性成分(通常非活性成分也是相同的)和標(biāo)簽貯存條件，因此無論是生產(chǎn)中引入，還是貯存過程中降解產(chǎn)生的雜質(zhì)，仿制肽類藥物都應(yīng)與RLD相同。

　　FDA通常在評估肽類藥物ANDA時會考慮肽藥物產(chǎn)品的活性成分、非活性成分、貯存條件和降解所產(chǎn)生雜質(zhì)的相同性，這與非肽藥物的ANDA評估相一致。

　　另外肽的生產(chǎn)過程中也可能產(chǎn)生特定的雜質(zhì)。由rDNA技術(shù)產(chǎn)生的雜質(zhì)可分為三類：

　　● 肽相關(guān)雜質(zhì)：包括與活性成分相關(guān)，但不同于活性成分的氨基酸序列，氨基酸序列的插入，缺失或其它修飾(例如氧化或糖基化)和肽殘基；

　　● 宿主細(xì)胞相關(guān)雜質(zhì)：包括宿主細(xì)胞DNA和宿主細(xì)胞蛋白；

　　● 其他(非肽相關(guān))雜質(zhì)：包括殘留溶劑，試劑和金屬等。

　　肽相關(guān)雜質(zhì)和其他(非宿主細(xì)胞相關(guān))雜質(zhì)可能是由重組和合成過程中產(chǎn)生的。然而，宿主細(xì)胞相關(guān)的雜質(zhì)僅發(fā)生在rDNA來源的肽類藥物產(chǎn)品中。

　　仿制合成肽類藥物與rDNA來源的RLD中的肽相關(guān)雜質(zhì)之間的差異可產(chǎn)生不同的雜質(zhì)特征，如果不受控制，可能影響合成肽類藥物的安全性或有效性。

　　FDA建議申請人采用靈敏和高分辨率的分析手段(例如，UHPLC-HRMS)來檢測和表征仿制合成肽類藥物中的肽相關(guān)雜質(zhì)，并與RLD相比較。

　　一般來說，對于本指南涵蓋的肽，申請人應(yīng)鑒定每種0.10%或更高的肽相關(guān)雜質(zhì)。根據(jù)特定產(chǎn)品潛在的免疫原性風(fēng)險，還可能要求申請人對于低于該閾值的肽相關(guān)雜質(zhì)也要做出鑒定。申請人應(yīng)確保仿制合成肽類藥物中的雜質(zhì)種類和雜質(zhì)水平不超過RLD(例如，通過調(diào)整合成路線或純化策略)。

　　基于對本指南涵蓋的肽類藥物中可能存在的肽相關(guān)雜質(zhì)的理解，考慮到目前控制肽相關(guān)雜質(zhì)的分析能力和制造能力，F(xiàn)DA認(rèn)為，如果仿制合成肽類藥物中新的特定肽相關(guān)雜質(zhì)水平不超過0.5%，對于本指南中涉及的任何一種肽類藥物按照ANDA途徑提交通常是合適的。新的特定肽相關(guān)雜質(zhì)水平高于0.5%會使FDA產(chǎn)生對在ANDA中無法充分解決的免疫原性潛在風(fēng)險的擔(dān)憂(例如，在這種情況下，對免疫原性風(fēng)險的評估將需要臨床資料)。

　　為了能夠符合ANDA申請的要求，不管是由重組還是合成產(chǎn)生的肽類藥物，不超過0.5%的新的特定肽相關(guān)雜質(zhì)水平應(yīng)與成品肽藥物中由于批次間變化而觀察到的少量非特定肽相關(guān)雜質(zhì)相一致。然而，在提交ANDA后將經(jīng)過隨后的科學(xué)審查，F(xiàn)DA可能會要求ANDA申請人進(jìn)一步降低特定肽相關(guān)雜質(zhì)的水平，這具體取決于與特定雜質(zhì)相關(guān)的風(fēng)險以及具體藥物品種。

　　對于不超過0.5%的每種新特定肽相關(guān)雜質(zhì)，ANDA申請人應(yīng)對雜質(zhì)進(jìn)行表征。此外，ANDA申請人應(yīng)提供為什么這種雜質(zhì)不影響仿制合成肽類藥物的安全性(包括關(guān)于免疫原性)以及有效性的理由。這種理由應(yīng)考慮雜質(zhì)的特性和數(shù)量，雜質(zhì)對肽的物理化學(xué)和生物學(xué)性質(zhì)的影響以及肽特有的潛在風(fēng)險。理由應(yīng)包括仿制合成肽類藥物和RLD之間雜質(zhì)的差異不會對以下各項因素產(chǎn)生影響：產(chǎn)品的物理化學(xué)性質(zhì)、生物活性或免疫原性風(fēng)險。這些數(shù)據(jù)應(yīng)證明每種新雜質(zhì)不含有對主要組織相容性復(fù)合物(MHC)(稱為T細(xì)胞表位)具有增加親和力的序列。此外，數(shù)據(jù)應(yīng)證明仿制合成肽類藥物不會增加形成聚集體的聚集傾向或質(zhì)量，特別是在強(qiáng)制條件下。并且不含與RLD相比對先天免疫活性具有更大或不同刺激的雜質(zhì)或污染物。根據(jù)所提供的信息，F(xiàn)DA還可能會建議對仿制合成肽類藥物進(jìn)行額外的非臨床免疫原性評估。

　　三、仿制合成肽類藥物按照ANDA途徑申請的要求匯總

　　對于仿制合成的高血糖素、利拉魯肽、奈西立肽、特立帕肽或替度魯肽藥物，采用經(jīng)批準(zhǔn)上市的rDNA來源的肽類產(chǎn)品作為RLD，如果符合ANDA法條法規(guī)，活性成分相同和雜質(zhì)方面的要求，那么按照ANDA提交申請通常是合適的。

　　具體要求如下：

　　● 仿制合成肽類藥物的特征在與RLD的活性成分具有相同的以下性質(zhì)：

　　◆ 主要序列和物理化學(xué)性質(zhì)

　　◆ 二級結(jié)構(gòu)

　　◆ 低聚物/聚集狀態(tài)

　　◆ 生物活性/功能(通過體外或動物研究)

　　● 對于仿制合成肽類藥物和RLD中都發(fā)現(xiàn)的肽相關(guān)雜質(zhì)，仿制產(chǎn)品中每種雜質(zhì)的含量都應(yīng)比RLD中發(fā)現(xiàn)的相同或更低。

　　● 仿制合成肽類藥物不得含有任何超過0.5%接受閾值的新的特定肽相關(guān)雜質(zhì)(即不存在于RLD中的雜質(zhì))。

　　● 對于不超過0.5%的任何新的肽相關(guān)雜質(zhì)，申請人應(yīng)表征雜質(zhì)結(jié)構(gòu)(例如，氨基酸序列和結(jié)構(gòu))，并應(yīng)說明為什么每種這樣的雜質(zhì)不影響仿制合成肽類藥物安全性(包括關(guān)于免疫原性)的理由，并且不影響其有效性。

　　對于這種ANDA申請，F(xiàn)DA建議申請人鑒定每種0.10%或更高的肽相關(guān)雜質(zhì)。對于不超過0.5%的每種新的特定雜質(zhì)，申請人應(yīng)表明仿制合成肽類藥物和RLD之間雜質(zhì)特征上的任何差異不會對以下各項因素產(chǎn)生影響的理由，包括產(chǎn)品的物理化學(xué)性質(zhì)、生物活性或免疫原性風(fēng)險。例如，數(shù)據(jù)應(yīng)該證明每個新雜質(zhì)不包含對稱為T細(xì)胞表位的MHC增加親和力的序列，并且仿制合成肽類藥物不會改變先天的免疫活性。

　　FDA可以酌情推薦根據(jù)505(j)(例如體外、體內(nèi)動物、藥代動力學(xué)/藥效學(xué)等效性)進(jìn)行額外的比較研究，以評估仿制合成肽類藥物是否符合相關(guān)的審批標(biāo)準(zhǔn)，包括用于制造，加工和包裝藥物的方法，以及用于制造，加工和包裝的設(shè)備和控制措施足以確保和保持其特性、規(guī)格、質(zhì)量和純度。

　　如果有必要進(jìn)行臨床研究以確定合成肽類藥物的安全性或有效性，并且該合成肽類藥物部分地依賴于FDA對先前批準(zhǔn)上市產(chǎn)品的安全性或有效性的數(shù)據(jù)庫，則應(yīng)按照505(b)(2)途徑來提交申請。

　　一旦根據(jù)505(c)途徑批準(zhǔn)了合成肽類藥物的申請，該合成肽類藥物的后續(xù)申請可按照ANDA申請?zhí)峤弧?/p>