液質(zhì)聯(lián)用與氣質(zhì)聯(lián)用類似,也是由兩部分組成,只是它的分離系統(tǒng)由氣相色譜改成了液相色譜,因此在應(yīng)用方面有所不同。
LC-MS主要用于不揮發(fā)性化合物、極性化合物、熱不穩(wěn)定化合物、大分子量(包括蛋白、多肽、多聚物等)化合物等的分析測定,且沒有商品化的譜庫可以對比查詢,只能自己建庫或者自己解析譜圖。
只有在真正了解了LC-MS,才能在日常的維護保養(yǎng)中做到更好。
一、原理、分類、特點
LC-MS原理概述
液質(zhì)聯(lián)用原理與氣質(zhì)聯(lián)用類似,它以液相色譜作為分離系統(tǒng),質(zhì)譜為檢測系統(tǒng)。樣品在質(zhì)譜部分和流動相分離,被離子化后, 經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按荷質(zhì)比分開,經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。
體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢的互補,將色譜對復雜樣品的高分離能力,與MS具有高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點結(jié)合起來,在藥物分析、食品分析和環(huán)境分析等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。
常用的兩大分類系統(tǒng):
一種是從質(zhì)譜的離子源角度來劃分,包括電噴霧離子源(ESI),大氣壓化學電離源(APCI),大氣壓光電離源(APPI)和基質(zhì)輔助激光解吸電離源(MALDI)等;
另一種是從質(zhì)譜的質(zhì)量分析器角度來劃分,包括四極桿、離子阱、飛行時間(TOF)和傅立葉變換質(zhì)譜等。ESI、APCI和APPI三種離子源大多與四極桿和離子阱質(zhì)譜聯(lián)用,是目前應(yīng)用最廣泛的幾種液質(zhì)聯(lián)用儀。
主要分析特點:
LC-MS除了可以分析氣相色譜一質(zhì)譜((GC-MS)所不能分析的強極性、難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定性的化合物之外,還具有以下幾個方面的優(yōu)點:
①分析范圍廣,MS幾乎可以檢測所有的化合物,比較容易地解決了分析熱不穩(wěn)定化合物的難題;
②分離能力強,即使被分析混合物在色譜上沒有完全分離開,但通過MS的特征離子質(zhì)量色譜圖也能分別給出它們各自的色譜圖來進行定性定量;
③定性分析結(jié)果可靠,可以同時給出每一個組分的分子量和豐富的結(jié)構(gòu)信息;
④檢測限低,MS具備高靈敏度,通過選擇離子(SIM)檢測方式,其檢測能力還可以提高一個數(shù)量級以上;
⑤分析時間快,LC-MS使用的液相色譜柱為窄徑柱,縮短了分析時間,提高了分離效果;
⑧自動化程度高,LC-MS具有高度的自動化。
二、保養(yǎng)維護
1、使用的穩(wěn)壓電源UPS,保證儀器電源電壓穩(wěn)定持續(xù)(特別是停電時對儀器的影響)。
2、每天用異丙醇溶液沖洗系統(tǒng)和清潔霧化室,定期開震氣閥震氣(對于ESI源,至少每星期做一次;對于APCI源,每天做一次),保證毛細管潔凈。
3、流動相流速不要過高,ESI離子源不要超過0.5ml/min,APCI不要超過1.0ml/min。
4、一年或者半年更換真空泵油。
5、控制好樣品運行的環(huán)境,包括溫度和濕度。
6、實驗完畢后要清洗進樣針、進樣閥等,用過含酸的流動相后,色譜柱和離子源都要用甲醇/水沖洗。
7、定期清洗樣品錐孔,關(guān)閉隔斷閥,取下樣品錐孔,先用甲醇:水:甲酸(45:45:10)的溶液超聲清洗10分鐘,然后在分別用超純水和甲醇各溶液超聲清洗10分鐘,待晾干后再安裝到儀器上。
8、流動相要現(xiàn)用現(xiàn)配,最好不要過夜,一定要新鮮。
9、定期更換電子倍增器。
(審核編輯: 林靜)
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